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免疫沉淀及免疫共沉淀 (Immunoprecipitation,IP及Co-IP)

服务内容

1、温和条件下进行蛋白抽提,BCA定量,调整蛋白浓度

2、样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育(进行WB验证可以免此步骤)

3、样品与IP抗体进行孵育,之后加入Protein A/G-Agarose进行孵育

4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理

5、沉淀产物SDS—PAGE或者WB鉴定,质谱鉴定由客户自行确定

6、Western blot检测

(1) 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

(3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

(4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光

7、预实验及正式实验服务

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服务编号 规格 目录价 会员价 实验周期 数量 购买
9-27 基因/ip ¥7000.00 登录查看
9-28 基因/coip ¥7500.00 登录查看
产品详情
客户提供材料

1、新鲜或正确保存的样品

2、目的蛋白一抗,空白或者阴性同种属IgG

3、阳性对照样品(尽量提供)

4、相关文献(可选)

提交给客户结果

1、预实验曝光结果(胶片及扫描图),预实验采取2个一抗稀释度

2、正式实验曝光结果(胶片及扫描图)

3、完整实验报告

4、IOD值分析报告(可选)

服务项目说明

1、待检测样品可以是待检测蛋白样品,也可以是细胞、组织等其他样品

2、免疫沉淀用抗体

3、检测用抗体

4、特异性二抗

样本要求:

1. 细胞>1×107;组织>100mg;细菌湿重>1mg;植物>100mg;血清>50ul

2. 样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量>200ug/样品